概述
MabPurix A45和MabPurixA65亲和填料以球形、窄分散,交联度高的琼脂糖凝胶为基质,通过赛分科技的独特技术将琼脂糖基质与耐碱性重组Protein A配基键合,专门用于单克隆抗体和含有Fc片段的重组蛋白类生物大分子的分离纯化。相比普通的琼脂糖凝胶,MabPurix A亲和填料的耐压性能更好。
填料结构
图1. MabPurix 亲和填料结构示意图
填料特性
& 高载量
& 良好的耐碱性(0.5 M NaOH)
& 极好的亲水性,优异的生物相容性
& 常规装柱条件下,体积变化小
& 产品供应能力:>100 L
技术参数
填料类型
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MabPurix A45
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MabPurix A65
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基质
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高交联度琼脂糖微球
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粒径
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45 μm
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65 μm
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配基
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耐碱性重组Protein A
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键合方式
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单点键合
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静态载量1
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70 mg hIgG/mL
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53 mg hIgG/mL
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动态载量2
(5 min
驻留时间)
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70 mg hIgG/mL
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53 mg hIgG/mL
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操作压力
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≤0.3 MPa(3 bar)
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pH范围
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3-12
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使用温度
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10~30℃
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耐碱性3
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浸泡于 0.5 M NaOH 25 h 后载量
大于初始载量的 70%
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CIP
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0.5 M NaOH
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保存方法
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50%(v/v),保存于20%乙醇中,2-8℃
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1. 静态载量测试方法:以3 mg/mL Human IgG in 100 mM Na-phosphate, pH 7.4为样品,30 min结合时间。
2.动态载量测试方法:以2.0 mg/mL Human IgG in 20 mM Na-phosphate+150 mM NaCl, pH 7.4为样品,使用6.6 mm×30 mm层析柱,5 min 驻留时间,载量以10%流穿计。
3. MabPurix A45的耐碱性测试见图2。
图2. MabPurix A45亲和填料耐0.5 M NaOH CIP性能
填料: MabPurix A45
柱体积: 1.1118 mL (6.6×32.5 mm)
操作温度: 20 ℃
上样缓冲液:2 mg/mL hIgG溶于 20 mM PB +
150 mM NaCl,pH 7.4
流速: 0.278 mL/min(4 min停留时间)
结合缓冲液:20 mM PB+150 mM NaCl,pH 7.4
洗脱缓冲液:0.1 M 甘氨酸-HCl
每个CIP循环
20 mM PB+150 mM NaCl,pH 7.4,15 min
0.5 M NaOH,15 min
20 mM PB+150 mM NaCl,pH 7.4,15 min
0.1 M Gly-HCl,pH 3.0,15 min
20 mM PB+150 mM NaCl,pH 7.4,15min
流速:0.5 mL/min
性能特点
(1)与其它市售琼脂糖亲和填料相比有更好的耐压性能。
(2)蛋白载量高。
图2. MabPurix A45和MabPurix A65亲和填料动态载量和驻留时间关系
层析柱:Generik 6.6 mm*30 mm 检测器:280 nm
样品:20 mM Na-phosphate,150 mM NaCl, pH 7.4 + 2.0 mg/mL Human IgG
平衡缓冲液:20 mM Na-phosphate,150 mM NaCl, pH 7.4
洗脱缓冲液:100 mM Gly-HCl, pH 3.0
流速:0.513 mL/min (2 min), 0.342 mL/min (3 min),
0.257 mL/min (4 min), 0.205 mL/min (5 min)
图3. MabPurix A45和MabPurix A65亲和填料压力相对流速曲线
层析柱: Generik 6.6 mm*20 cm
流动相: 20 mM Na-phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4
订货信息
产品名称
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粒径(µm)
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订货号
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MabPurix A45
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45
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270745990
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MabPurix A65
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65
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270765990
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包装规格为0.5, 1, 5, 10, 100L,预装柱规格为1, 5mL,也可根据客户的需要提供其它规格的产品和预装柱。